理化检验-化学分册

作者：朱波, 倪一平

关键词：免疫亲和柱, 超高效液相色谱-三重四极杆复合线性离子阱质谱法, 短裸甲藻毒素, 双壳贝类

在1.0 g充分匀质的样品中加入80%(体积分数,下同)甲醇溶液4 mL,涡旋2 min,超声10 min,冷冻(4℃)离心5 min,重复提取一次。合并上清液,用80%甲醇溶液稀释至10 mL。分取5 mL,加入20 mL磷酸盐缓冲液(pH 7.3),涡旋混匀。上述溶液过活化好的免疫亲和柱,用20%(体积分数)甲醇溶液3 mL淋洗柱子,加压抽干柱子后再加入甲醇3 mL洗脱,净化过程中控制温度为室温,过柱速率为2~3 mL·min-1。收集洗脱液,分取1.0~1.5 mL,离心10 min,上清液用超高效液相色谱-三重四极杆复合线性离子阱质谱法测定。以Poroshell 120 EC-C18色谱柱为固定相,以不同体积比的10 mmol·L-1甲酸铵-0.1%(体积分数)甲酸溶液和甲醇的混合溶液为流动相进行梯度洗脱,用多反应监测-信息依赖性分析-增强子离子(MRM-IDA-EPI)扫描模式获得定量结果,并同时完成目标物二级质谱图的匹配。结果显示:短裸甲藻毒素的质量浓度在5~500 μg·L-1内与其对应的峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为30 μg·kg-1;对阴性样品进行加标回收试验,回收率为80.5%~108%,测定值的相对标准偏差(n=6)为3.1%~6.0%。方法用于双壳贝类样品的分析,未检出短裸甲藻毒素,而加标样品中目标物的EPI二级质谱图与标准二级质谱图的匹配度值、反匹配度值和纯度值均达到60%以上,说明目标物和短裸甲藻毒素相似度较高。

来源：2022年第8期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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