理化检验-化学分册

作者：梁杨, 王小玲, 郭廷, 郭礼强, 李亚静

关键词：冠心病, 高效液相色谱-串联质谱法, 血浆, 氨基酸, 代谢

取血浆样品2 mL，加入体积比89：10：1的乙腈-水-甲酸混合液4 mL，涡旋，离心。取上清液4 mL，用200 mg C18和100 mg氨丙基粉净化，涡旋，静置后取2 mL上清液，加入4 mL甲醇混匀，氮吹至近干。残渣用体积比80：20的1.5%（体积分数）甲酸溶液-乙腈的混合液0.5 mL溶解，振荡、过滤后，采用高效液相色谱-串联质谱法（HPLC-MS/MS）测定滤液中14种氨基酸（脯氨酸、色氨酸、犬尿氨酸、丙氨酸、缬氨酸、甘氨酸、苏氨酸、精氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸）的含量。色谱分析中以InertSustain AQ-C18柱为固定相，以不同体积比的水-乙腈-甲酸的混合液为流动相进行梯度洗脱。质谱分析中采用电喷雾离子源正离子（ESI+）模式和多反应监测（MRM）模式。结果表明，14种氨基酸的质量浓度在一定范围内与对应的峰面积呈线性关系，测定下限（10S/N）为0.50~2.50 μg·L-1。血浆样品在3个浓度水平下进行加标回收试验，回收率为82.3%~102%，测定值的相对标准偏差（n=6）为3.3%~12%。

来源：2022年第9期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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