理化检验-化学分册

作者：马琳琳, 刘珍, 马腾州, 清江, 田衍香, 丁利

关键词：蜡样芽孢杆菌, 荧光定量聚合酶链式反应(PCR), gyrB基因, 食品

以蜡样芽孢杆菌gyrB基因作为目标基因并设计特异性引物,用95 ℃预变性5 min、95 ℃变性15 s、50 ℃复性30 s、72 ℃延伸30 s,反应45个循环为反应程序,以蜡样芽孢杆菌DNA为模板进行荧光定量聚合酶链式反应(PCR),提出了食品中蜡样芽孢杆菌快速检测的方法,并对该方法特异性、蜡样芽孢杆菌DNA灵敏度以及活菌检出限进行验证。结果表明,该引物在分段扩增中可以实现对蜡样芽孢杆菌的快速检测,而且重复性好;以3种非蜡样芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌进行特异性试验,非蜡样芽孢杆菌均没有扩增出曲线,仅蜡样芽孢杆菌扩增出特异性曲线;蜡样芽孢杆菌DNA按10倍稀释法进行灵敏度检测,可达0.01 mg·L-1,活菌检出限为8.9×102CFU·mL-1。

来源：2022年第12期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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