理化检验-化学分册

作者：梁金良, 陈晓彤, 胡坤华

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS), 多巴胺及其代谢物, 帕金森病, 小鼠纹状体

提出了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定小鼠纹状体中多巴胺（DA）及其代谢物高原儿茶酸（DOPAC）与高香草酸（HVA）含量的方法。取小鼠纹状体约10 mg，用200 μL 2%（体积分数）甲酸溶液提取、离心。取上清液80 μL，加入40 μg·L-1异丙肾上腺素（内标）溶液10 μL和含0.1%（体积分数，下同）乙酸的甲醇溶液10 μL，涡旋混匀，再加入100 μL甲醇，涡旋、离心。上清液中DA及其代谢物在Gemini NX-C18色谱柱上分离，以不同体积比的0.1%乙酸溶液和含0.1%乙酸的甲醇溶液混合液为流动相进行梯度洗脱，质谱分析采用电喷雾离子源正、负离子模式，选择反应监测（SRM）模式扫描。结果表明，3种目标物在7.00 min内能完成测定。DA、DOPAC和HVA标准曲线的线性范围分别为0.05~100，0.5~1 000，0.25~500 μg·L-1，检出限分别为0.015，0.150，0.075 μg·L-1。按照标准加入法进行回收试验，回收率为84.4%~117%，日内精密度和日间精密度试验所得测定值的相对标准偏差均小于15%。质控样品在自动进样器中保存8 h、4℃保存24 h以及-80℃保存30 d前后3种目标物测定值的相对误差绝对值不大于20%，说明样品稳定性良好。

来源：2023年第12期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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