理化检验-化学分册

作者：蒲文静, 白莹, 董娜, 张爱菊, 张小林

关键词：过氧化氢酶, 活性, H₂O₂, 丁基玫瑰红B, 荧光

利用H2O2-Fe2+可以快速使丁基玫瑰红B（BRMB）发生荧光猝灭,而过氧化氢酶（CAT）对该猝灭有抑制效应,提出了基于H2O2-BRMB-Fe2+体系的荧光猝灭法测定血清CAT活性的方法。取血清样品10 μL,加入1 mmol·L-1 H2O2底液0.50 mL,于30 ℃恒温反应15 min,再依次加入0.02 mmol·L-1 BRMB溶液0.70 mL、0.1 mol·L-1冰乙酸-乙酸钠缓冲液（pH 4.2）1.00 mL和0.01 mol·L-1 Fe2+溶液0.08 mL,于室温反应20 min后用水定容至10 mL,测定体系在590 nm发射波长处的荧光强度F；以煮死酶液为对照,按照同样的方法测定其在590 nm发射波长处的荧光强度F0。结果表明：CAT活性在0.005～0.05 U·mL-1内与体系荧光强度差值F-F0呈线性关系,检出限（3s/k）为1.2×10-3 U·mL-1；方法用于6份不同年龄健康人群血清CAT活性分析,测定值为31.50～72.30 U·mL-1,与碘量法基本一致,CAT活性的加标回收率为95.2%～102%,测定值的相对标准偏差（n=6）为1.7%～3.3%。

来源：2024年第1期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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