理化检验-化学分册

作者：陈贺, 郑洋, 蒋旭燕, 吴继魁

关键词：GR-5脱氧核酶, 催化发夹自组装等温扩增技术, Pb²⁺, 荧光传感体系

基于GR-5脱氧核酶（GR-5 DNAzyme）对Pb2+的特异性识别和发夹DNA动态自组装树枝状聚合物信号放大策略,构建了一种新型无酶、高灵敏检测Pb2+的荧光传感体系。分别于95℃恒温孵育合成序列扩展GR-5 DNAzyme复合物（GR-5E-S,由GR-5 DNAzyme酶链GR-5E和底物链GR-5S合成）以及Y型骨架（由骨架链Y1、Y2、Y3合成）,于25℃恒温孵育合成发夹三聚体（由Y型骨架和发夹链H1、H2、H3合成,其中发夹链H1上修饰有荧光团和猝灭团）。将水样4μL添加到96μL含400 nmol·L-1 GR-5E-S,400 nmol·L-1发夹三聚体的反应溶液中,于25℃孵育40 min。当水样中存在Pb2+时,GR-5E-S识别Pb2+,底物链被切割,酶链和底物链分开并释放出目标链T,目标链T与发夹链H1杂交触发动态自组装过程,生成树枝状聚合物,于520 nm处测量荧光强度。结果显示：建立的荧光传感体系可在40 min内完成检测；Pb2+的浓度在0.1～10.0 nmol·L-1内与对应的传感体系的荧光强度呈线性关系,检出限（3s/k）为19 pmol·L-1；按照标准加入法进行回收试验,回收率为98.0%～108%,测定值的相对标准偏差（n=5）不大于15%。

来源：2024年第2期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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