理化检验-化学分册

作者：卢鑫, 张琳, 王铁良, 周晓华

关键词：高效液相色谱-氢化物发生-原子荧光光谱法（HPLC-HG-AFS）, 硒, 大豆, 硒代氨基酸, 硒形态

取0.1 g脱脂后富硒大豆样品于离心管中,用5 mL pH 7.5的130 mmol·L-1三（羟甲基）氨基甲烷-盐酸缓冲液超声振荡30 min,用15 mg链霉蛋白酶于37 ℃振荡酶解5 h,离心后取上清液,过0.22 μm尼龙有机滤膜。滤液中的硒代半胱氨酸（SeCys）、硒代蛋氨酸（SeMet）、甲基硒代半胱氨酸（MeSeCys）在Agela MP-C18色谱柱上分离,以含2%（体积分数）甲醇和0.5 mmol·L-1四丁基溴化铵的40 mmol·L-1磷酸氢二铵溶液（pH 7.0）进行等度洗脱,并采用氢化物发生-原子荧光光谱法测定3种硒代氨基酸的含量。结果表明,3种硒代氨基酸在7 min内可以实现基线分离,标准曲线的线性范围均为5～100 μg·L-1,检出限依次为0.086,0.075,0.047 mg·kg-1。按照标准加入法进行回收试验,回收率为85.5%～103%,测定值的相对标准偏差（n=7）不大于3.0%。方法用于分析富硒大豆中的硒代氨基酸,大豆中硒赋存形态多为SeMet,含量占总硒量的85.5%～94.5%。

来源：2024年第3期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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