理化检验-化学分册

作者：戚立凯, 戚露月, 严方, 蒋青, 施静, 夏瑜

关键词：氨基酸, 神经递质, 人血清, 超高效液相色谱-串联质谱法, 2型糖尿病

为同时、准确测定人体内重要的小分子代谢物氨基酸和神经递质，为疾病的发生和发展诊断提供技术参考，采用超高效液相色谱-串联质谱法（UHPLC-MS/MS）测定健康人和2型糖尿病人血清中20种氨基酸和6种神经递质的含量，并利用t检验筛选显著性差异化合物。冷冻人血清样本于4 ℃解冻后，用水稀释20倍。分取稀释血清或血清10 μL，加入含10 mmol·L−1盐酸的乙腈溶液390 μL，涡旋振荡5 min，离心10 min，取上清液，采用UHPLC-MS/MS测定。以Waters Acquity UPLC BEH Amide色谱柱为固定相，0.2%（体积分数，下同）甲酸溶液-含0.2%甲酸的乙腈溶液体系（18种目标物）或含5 mmol·L−1乙酸铵的0.2%甲酸溶液-含0.2%甲酸的乙腈溶液体系（8种目标物）作为流动相进行色谱分离，以电喷雾离子源正、负离子模式电离，多反应监测模式检测，基质匹配法定量。结果显示：26种目标物的质量浓度在一定范围内和峰面积呈线性关系，检出限为0.4～1 000 μg·L−1；按照标准加入法进行回收试验，回收率为87.4%～113%，测定值的相对标准偏差（n=6）为0.10%～12%。方法用于健康人和2型糖尿病人血清的分析，检出了20种目标物，筛查出13种显著性差异化合物。

来源：2025年第11期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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