理化检验-化学分册

作者：闫萌萌, 朱天硕, 温超

关键词：二维液相色谱法, 气相色谱-燃烧-同位素比质谱法, 福美司坦, 尿样, 纯化

为避免复杂的乙酰化操作以及满足世界反兴奋剂机构（WADA）对尿样中福美司坦的确证要求，进行了题示研究。取尿样24 mL，平均分为2份，每份加入4 mL 0.2 mol·L−1磷酸盐缓冲溶液（pH 6.5）和300 μL β-葡萄糖醛酸甙酶工作溶液（5×107 U·L−1），涡旋混匀，于55 ℃水解2 h，再加入16 mL叔丁基甲醚，于室温离心3 min。合并上层有机相，氮气吹干，用65 μL甲基睾酮和睾酮（二维液相色谱法的运行内标）质量浓度均为100 mg·L−1的混合内标溶液复溶，分别在第一维和第二维液相色谱柱上使用不同洗脱程序进行洗脱，收集目标馏分后，于75 ℃氮气吹干，用20 μL 20 mg·L−1 5α-雄甾烷-3β-醇气相色谱-燃烧-同位素比质谱法（GC-C-IRMS）的运行内标内标溶液复溶，采用GC-C-IRMS测定δ13C值，与WADA规定的内源性化合物的δ13C值比对来确证目标物是否由外源性摄入。结果表明：二维液相色谱系统可有效分离尿样中福美司坦和其他内源性物质类固醇激素及其代谢产物；在纯化WADA规定需要确证的50～150 μg·L−1福美司坦时，不会产生同位素分馏效应，且对低浓度水平（40 μg·L−1）的福美司坦的回收率达到79.2%。方法用于质量控制尿样的分析，日内和日间精密度试验所得的δ13C值的相对标准偏差（n=5）分别为0.15%和0.35%；继而用于加标空白尿样的分析，δ13C测定值与加标量差值仅为−0.38‰，能够满足GC-C-IRMS对尿样的纯化要求。

来源：2026年第2期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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