理化检验-化学分册

作者：王潇, 王凯君, 杜一平, 张维冰, 宋亮, 徐慧婷

关键词：多肽固相合成, 紫外分光光度法, 9-芴甲氧羰基（Fmoc）, 1-（9-芴基甲基）哌啶, 偶联率

多肽固相合成是制备多肽类药物最常用的方法之一，树脂表面氨基酸的偶联率直接决定了反应的进程并最终影响到产品质量。氨基酸衍生物上的保护基团9-芴甲氧羰基（Fmoc）通常采用与哌啶反应生成1-（9-芴基甲基）哌啶的方法脱除。利用紫外分光光度法对反应液中的Fmoc进行测定，通过对9-芴甲氧羰基氨基酸与多肽固相合成中偶联率的研究，发展了相应的偶联率计算方法。结合高效液相色谱分析结果，测定1-（9-芴基甲基）哌啶的最佳条件为：反应温度30 ℃，反应时间3 min，检测波长301 nm。1-（9-芴基甲基）哌啶的浓度在0.002～0.08 mmol·L−1内与对应的吸光度呈线性关系，检出限（3s/k）为3.13×10−4 mmol·L−1。按照标准加入法进行回收试验，回收率为93.8%～99.7%。精密度（n=7）和重复性（n=5）试验结果显示，测定值的相对标准偏差均小于3.0%。Fmoc定量法结合高效液相色谱法对树脂表面氨基酸的偶联率进行应用分析，为多肽固相合成过程中反应的实时监测以及产品质量的提高提供了一种可行的新途径。

来源：2026年第3期

《理化检验-化学分册》期刊编辑部

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